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海參中蛋白的測(cè)試方法

海參中蛋白的測(cè)試方法

1、使用儀器

K9860凱氏定氮儀;SH220石墨消解儀;WD01排廢系統(tǒng);

2、使用試劑

濃硫酸(密度為1.8419g/L);催化劑(硫酸鉀;硫酸銅);0.1mol/L硫酸或鹽酸滴定液;2%硼酸;40%氫氧化鈉;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑;

3、實(shí)驗(yàn)方法

1)干燥的海參

a.樣品前處理：

待測(cè)海參樣，粉碎后過(guò)80目篩。

b.樣品 消解：

取樣品0.2克;加入催化劑3g(催化劑為 硫酸銅,硫酸鉀1:15比例混勻);吸取8ml濃硫酸加入消化管，同時(shí)做樣品空白，樣品空白除樣品不加其他試劑正常加入，用SH220石墨消解儀消解，消解溫度：升溫至300℃消化20-30分鐘，再升溫至420℃消解至液體呈藍(lán)綠色澄清透明，再消解30-60分鐘。

c.樣品 蒸餾：

用K9860全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行蒸餾測(cè)試，氫氧化鈉為濃硫酸的4倍為宜(具體看加氫氧化鈉后 樣品是否變黑褐色，保證一定為過(guò)量的氫氧化鈉)。

2)濕的海參

a.樣品前處理：

待測(cè)海參樣，用剪刀剪碎(剪的碎點(diǎn)即可，知道不能剪為止)。取樣2-3g

b.樣品 消解：

各加入催化劑3.5g(催化劑為 硫酸銅,硫酸鉀1:15比例混勻);靜止五分鐘，吸取10ml濃硫酸加入消化管，再靜止十分鐘(樣品有水，加濃硫酸靜止數(shù)分鐘后消解保證安全)，做樣品空白2個(gè)，樣品空白除樣品不加其他試劑正常加入，用SH220石墨消解儀消解，消解溫度：升溫至300℃消化20-30分鐘，再升溫至420℃消解至液體呈藍(lán)綠色澄清透明，再消解30-60分鐘，冷卻至室溫。

c.樣品 蒸餾：

用K9860全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行蒸餾測(cè)試，氫氧化鈉為濃硫酸的4倍為宜(具體看加氫氧化鈉后 樣品是否變黑褐色，保證一定為過(guò)量的氫氧化鈉)。